Na pytania odpowiadają eksperci z firmy HTL Lab Solutions Poland.

Tematyka zadawanych pytań może dotyczyć następujących zagadnień:
- zasady poprawnego pipetowania,
- techniki pipetowania (np. pipetowanie rewersyjne),
- czyszczenie i konserwacja pipet,
- jak samodzielnie rekalibrować pipetę,
- problemy z działaniem pipety,
- jak sprawdzić dokładność pipety,
- jak działa pipeta,
- odporność na autoklawowanie, sterylizację UV,
- prawidłowa nastawa pojemności,
- dobieranie końcówek do pipet,
- jak pipetować gęste i lepkie ciecze,
- co oznaczają parametry A% i P%,
- jak działa pipetor,
- prawidłowa obsługa pipetora,
- jak czyścić pipetor,
- czy pipetor można autoklawować,
- serwis pipet i pipetorów,
oraz inne zagadnienia dotyczące pipetowania, dozowania oraz pipetorów i dozowników.

Jeżeli masz pytanie do naszych ekspertów po prostu je zadaj.
pipety@e-biotechnologia.pl
Uwaga. Pytania i odpowiedzi, jeśli nadawca e-maila nie zaznaczy inaczej, będą publikowane na łamach serwisu e-biotechnologia.pl

Pytania i odpowiedzi

Pytanie:
Jestem studentem biotechnologii. Chciałem zapytać Państwa o dwie kwestie związane z pipetowaniem, mianowicie: jak samodzielnie rekalibrować pipetę (czy pipety różnych firm kalibruje się inaczej, czy zasada jest podobna) oraz jak pipetować gęste i lepkie ciecze, zwłaszcza przy niewielkich objętościach pipetowanej mieszaniny. Chciałem też zapytać o następujący problem: pipetując niektóre ciecze (np. alkohol etylowy) dochodzi do wypływu substancji z tipsa (zwłaszcza przy pipetowaniu większych objętości, np 500 mikrolitrów). Czy jest to problem z pipetą, tipsem, czy tylko kwestia współczynnika lepkości cieczy pipetowanej.

Odpowiedź (Grupa Ekspertów HTL):
Ogólna zasada rekalibracji pipet automatycznych różnych producentów jest podobna. Istnieje jednak wiele różnic w sposobie przeprowadzenia procedury rekalibracji konkretnego modelu pipety, dlatego zawsze należy postępować zgodnie z instrukcją rekalibracji podaną przez producenta danej pipety. Często producenci pipet podają na swoich stronach internetowych wskazówki dotyczące czyszczenia i rekalibracji pipet. Taka instrukcja obowiązkowo powinna znaleźć się w opakowaniu z pipetą. Dokładną instrukcję procedury rekalibracji „krok po kroku” znajdzie pan na stronie ww.htl.com.pl w sekcji Pomoc=> Rekalibracja pipet HTL.

Niektóre ciecze mają tendencję do przylegania do powierzchni końcówek (szczególnie: surowica, roztwory białkowe, rozpuszczalniki organiczne) powodując zwiększenie wartości dopuszczalnego błędu. Aby mieć pewność, że napięcie powierzchniowe nie wpłynie na zmianę objętości pobieranej próbki, należy przepłukać końcówkę. W tym celu należy wykonać jeden pełny cykl pipetowania danej cieczy do tego samego naczynia. Przepłukanie końcówki jest zawsze zalecane w przypadku, gdy chcemy osiągnąć maksymalną dokładność. Inną metodą redukującą błąd powstający przy pracy z cieczami o dużej gęstości jest tzw. pipetowanie rewersyjne. Metoda ta wykorzystuje funkcję wydmuchu do zwiększenia siły pobierania. Przy stosowaniu tej metody należy zwracać uwagę, aby nie zalać wnętrza trzonu.
1.Wciśnij przycisk pipetowania do oporu
2. Zanurz końcówkę w cieczy
3. Zwolnij przycisk bardzo wolno do pozycji wyjściowej uważając, aby kolumna cieczy jednostajnie podnosiła się w końcówce
4.Wyjmij końcówkę z cieczy przesuwając ją wzdłuż ścianki naczynia w celu usunięcia pozostałości płynu 5.Wydaj ciecz do naczynia wciskając przycisk płynnym ruchem do pierwszego oporu. Trzymaj przycisk w tej pozycji kilka sekund
6. Usuń pozostałą ciecz z końcówki

Alkohol etylowy ma wysoki współczynnik parowania – paruje i się skrapla.