biotechnologia


 
 

Bufor TBE

<img src="http://e-biotechnologia.pl/kolba.png" ALIGN="left" alt="szkolenia" HSPACE=5 VSPACE=5 /> TBE (10x stężony; TRIS, kw. borowy, EDTA)


Bufor TBE - przeznaczenie

TBE jest buforem wykorzystywanym m.in. do elektroforezy na żelu agarozowym i poliakrylamidowym kwasów nukleinowych, tj. DNA i RNA. Posiada wyższą pojemność buforującą oraz niższe przewodnictwo elektryczne od buforu TAE. Zawarty w TBE boran jest silnym inhibitorem enzymów (np. ligaz, restryktaz, czy polimeraz DNA), dlatego nie jest polecany w przypadku konieczności wycinania DNA z żelu i wykorzystania go do dalszych analiz (DNA gel-out). TBE pozwala na rozdział niewielkich fragmentów, poniżej 500 pz (np. produktów reakcji PCR, fragmentów restrykcyjnych).


Przygotowanie roztworu TBE (objętość 1 litra)

Do objętości 800 ml destylowanej lub podwójnie destylowanej wody (ddH2O) dodaj:
108 g Tris (pH 8.3)
55 g kwasu borowego
40 ml 0,5 M EDTA (pH 8)

Uzupełnij destylowaną lub podwójnie destylowaną wodą do objętości 1 litra. Bufor przechowuje się w temp. pokojowej lub w temp. +4 st. Celsjusza. Bufor roboczy 1x zawiera 90 mM Tris-boran oraz 2mM EDTA.


Roztwór TBE - wskazówki

Przed użyciem stężony bufor TBE należy rozcieńczyć do stężenia roboczego 1X. Aby uzyskać stężenie robocze 1x należy na 1 część 10x stężonego buforu dodać 9 części wody destylowanej.
Najczęściej przygotowywane są bufory magazynowe 5x i 10x, tzw. stock. pH stężonego buforu powinno wynosić ok 8,3. Należy pamiętać, że lepiej przechowuje się bufor 5x stężony, gdyż nie dochodzi do wytrącania z roztworu substancji w nim rozpuszczonych. Przesączanie buforu przez filtr, o porach wielkości 0,22 mikrometra, usuwa wytrącenia.



Menu główne

Podręcznik biotechnologii

Kto jest online

85 anonymous users oraz 0 registered users online.

Jesteś niezarejestrowanym lub niezalogowanym użytkownikiem.


 
 
 
Partnerzy:

laboratoria.net Nauka w Polsce Academio Fundacja NanoNet BioCen - BioCentrum Edukacji Naukowej Notatek.pl cebioforum.com materialyinzynierskie.pl Wspieram.to - POLSKI KICKSTARTER - Polska platforma finansowania społecznoœciowego.Tu zrealizujš się Twoje pomysły. Portal popularnonaukowy

Portal: Redakcja . Współpraca . Kontakt . Polecamy



Wszystkie prawa zastrzeżone 2006-2016 e-biotechnologia.pl
stat4u